Широко використовуваний комерційний ІФА не виявляє попередника гаптоглобіну2, але визнає

Експериментальна ендокринологія

Редаговано
Доктор Сомен К. Майтра

Університет Вісва-Бхараті, Індія

Переглянуто
Іконг Лі

Медицина Джона Хопкінса, США

Асаманджа Чатторай

Інститут біоресурсів та сталого розвитку (IBSD), Індія

Приналежності редактора та рецензентів є останніми, наданими в їхніх дослідницьких профілях Loop, і вони не можуть відображати їх ситуацію на момент огляду.

комерційний

  • Завантажити статтю
    • Завантажте PDF
    • ReadCube
    • EPUB
    • XML (NLM)
    • Додаткові
      Матеріал
  • Експортне посилання
    • EndNote
    • Довідковий менеджер
    • Простий текстовий файл
    • BibTex
ПОДІЛИТИСЯ НА

СТАТТЯ Оригінального дослідження

  • 1 Медичний центр Лейпцизького університету, Хвороби ожиріння IFB, Лейпциг, Німеччина
  • 2 відділи ендокринології та нефрології, Університет Лейпцига, Лейпциг, Німеччина
  • 3 Кафедра фармацевтичної хімії та біоаналітики, Інститут фармації, Університет Мартіна-Лютера Галле-Віттенберг, Галле, Німеччина
  • 4 Науково-дослідний центр імунології та біології слизової оболонки, штат Массачусетс, лікарня –– Гарвардська медична школа, Бостон, Массачусетс, США
  • 5 Факультет біологічних наук, фармації та психології, Інститут біохімії, Лейпцизький університет, Лейпциг, Німеччина

Передумови: З'являється все більше доказів про роль порушення проникності кишечника при ожирінні та пов'язаних з цим метаболічних захворюваннях. Зонулін - це встановлений сироватковий маркер проникності кишечника і ідентичний прегаптоглобіну2. Тут ми мали на меті дослідити взаємозв’язок між циркулюючим зонуліном та метаболічними ознаками, пов’язаними з ожирінням.

Методи: Зонулін у сироватці крові вимірювали за допомогою широко використовуваного комерційного набору ІФА у 376 суб’єктів із добре охарактеризованої метаболічної когорти сорбів з Німеччини. Крім того, генотип гаптоглобіну визначали у зразках ДНК у всіх досліджуваних.

Результати: Оскільки концентрації зонуліну не корелювали з генотипами гаптоглобіну, ми досліджували специфічність аналізу зонуліну ELISA, використовуючи експерименти з захоплення антитіл, мас-спектрометрію та Вестерн-блот-аналіз. Використовуючи зразки сироватки, які дали найвищий або найнижчий рівень ІФА-сигналів, ми виявили кілька білків, які, ймовірно, будуть захоплені антитілом у цьому наборі. Однак жоден з цих білків не відповідає прегаптоглобіну2. Ми використовували зростаючі концентрації рекомбінантного прегаптоглобіну2 та комплементу С3 як одного з репрезентативних захоплених білків, і набір ELISA також не виявив. Вестерн-блот-аналіз з використанням як поліклональних антитіл, використаних у цьому наборі, так і моноклональних антитіл, піднятих проти зонуліну, продемонстрував подібний характер розпізнавання білка, але з різною інтенсивністю виявлення. Білок (и), виміряний за допомогою набору ELISA, значно збільшився у пацієнтів з діабетом та ожирінням і сильно корелював з маркерами ліпідного та глюкозного обміну. Поєднуючи мас-спектрометрію та Вестерн-блот-аналіз з використанням поліклональних антитіл, що використовуються в наборі ELISA, ми визначили пропердин як іншого члена сімейства зонулінів.