Застосування проникних для клітин пептидів NBD для придушення запалення
Анотація
Розпізнавання патогенів за вродженими або адаптивними імунними рецепторами призводить до активації клітин, що відображають ці рецептори - наприклад, макрофагів, дендритних клітин та лімфоцитів. Сигнал, генерований лігандованим рецептором, повідомляється про зміни в експресії генів, що призводять до посиленої експресії ефекторних молекул, таких як цитокіни та молекули адгезії. 1 Цей процес залежить від активації різних індуцибельних факторів транскрипції, серед яких члени сімейства транскрипційних факторів ядерного фактора (NF) -κB відіграють еволюційно збережену та критичну роль.
Шлях NF ‐ κB
Фігура 1 Зображення класичного та альтернативного NF-кВ шляхів (передруковано з дозволу посилання 5).
NF ‐ κB при хворобі
Дослідження, проведені за останні два десятиліття, допомогли встановити NF κκ як ключовий регулятор багатьох біологічних процесів. Загалом, однак, індукована активність NF-κB найбільш тісно пов'язана з наростанням вроджених та адаптивних імунних відповідей, а також як антиапоптотичний фактор пробудження, який, ймовірно, допомагає запобігти вбивству імунних клітин під час інфекції. Отже, аномальна активація NF-κB здебільшого призводить до захворювань, які є наслідком порушення регульованої запальної реакції або виживання. Див. Таблицю 1 1 щодо основних захворювань людини, з якими пов'язаний NF-κB.
Ідентифікація NEMO-зв'язуючого домену IKKα та IKKβ
Малюнок 2 Регіон IκB-кіназ (IKK), необхідний для взаємодії з основним модулятором ядерного фактора (NF) -KB (NEMO). (А) Усічені мутанти IKK, у яких відсутній крайній COOH-кінець (1–733), вільна від серину область (1–707), багатий на серин домен (1–662) та 1 область (1–644) були використані для висувного аналізу за GST-NEMO. Жоден з мутантів не взаємодіяв з GST. (B) Пептиди NBD дикого типу (WT) інгібували взаємодію IKKβ з NEMO in vitro та запобігали утворенню ендогенного комплексу IKK у клітинах HeLa. Навпаки, мутантні пептиди (MUT), у яких W739 та W741 були заміщені аланіном, були неактивними. (C) Вплив пептидів, що зв'язують домен NEMO (NBD), на активність NF-κB в клітинах HeLa після стимуляції фактором некрозу пухлини α (TNFα) (з посилання 61).
Застосування проникного для клітин пептиду NBD для інгібування запалення на моделях тварин
Здатність проникного для клітин пептиду NBD пригнічувати активність NF κB в клітинах змусила нас запитати, чи введення цього пептиду тваринам також призведе до пригнічення активності NF κκB. У нашому оригінальному звіті, що описує пептид NBD, ми продемонстрували, що місцеве введення цього пептиду змогло придушити індукований форболом 12-міристат 13-ацетат (РМА) набряк вух, демонструючи тим самим його ефективність для тварин. Для кращого встановлення потенційної ефективності цього пептиду у придушенні запалення на тваринних моделях, більш відповідних хворобам людини, ми використовували дві миші моделі запалення, одну з використанням карагенану для імітації гострої запальної реакції та модель колагенового артриту (ЦРУ) для імітації хронічне запальне захворювання. У наступних розділах ми пропонуємо короткі короткі викладки цих опублікованих досліджень, щоб продемонструвати ефективність пептиду NBD як протизапального препарату у тварин. 62