Знижена оксигенація жирових тканин при цукровому діабеті ожиріння людини

Докази розрідження, хемотаксису макрофагів та запалення без ангіогенної реакції

  1. Магдалина Пасаріка,
  2. Ольга Р. Середа,
  3. Леан М. Редман,
  4. Діана С. Альбарадо,
  5. Девід Т. Гаймель,
  6. Лора Е. Роан,
  7. Дженніфер К. Руд,
  8. Девід Х. Берк і
  9. Стівен Р. Сміт
  1. З біомедичного дослідницького центру Пеннінгтона, Батон-Руж, штат Луїзіана
  1. Автор-кореспондент: Стівен Р. Сміт, smithsrpbrc.edu

Докази розрідження, хемотаксису макрофагів та запалення без ангіогенної реакції

Анотація

ЦІЛЬ - На основі досліджень на гризунах ми вивчили гіпотезу, згідно з якою збільшення маси жирової тканини (АТ) при ожирінні без належної підтримки васкуляризації може призвести до гіпоксії, інфільтрації макрофагів та запалення.

знижена

ДИЗАЙН ДИЗАЙН І МЕТОДИ - Парціальний тиск кисню (AT pO2) та температура AT в черевній АТ (9 худих і 12 чоловіків та жінок із надмірною вагою/ожирінням) вимірювали шляхом прямого введення полярографічного електрода Кларка. Склад тіла вимірювали за допомогою двоенергетичної рентгенівської абсорбціометрії, а чутливість до інсуліну вимірювали за допомогою гіперінсулінемічно-евглікемічного затиску. Підшкірну тканину черевної порожнини використовували для фарбування, кількісної RT-PCR та аналізу секреції хемокінів.

РЕЗУЛЬТАТИ— AT pO2 був нижчим у осіб із надмірною вагою/ожирінням, ніж у худих (47 ± 10,6 проти 55 ± 9,1 мм рт. Ст.); однак цей рівень pO2 не активував класичні мішені гіпоксії (піруватдегідрогеназакіназа та фактор росту судинного ендотелію [VEGF]). AT pO2 негативно корелював із відсотком жиру в організмі (R = -0,50, P 2) або надмірною вагою/ожирінням (27–35 кг/м 2). Набір проводився через газетний папір, листівки та веб-сторінку Пеннінгтонського центру біомедичних досліджень (PBRC). Суб'єктів виключали, якщо вони мали значні захворювання нирок, серця, печінки, легенів або неврологічні захворювання. Гіпертонія була прийнятною, якщо артеріальний тиск становив 2 на хвилину) тривала протягом 3-4 годин. Інсулін вводили щонайменше 1 год після досягнення концентрації глюкози ∼90 мг/дл. Глюкозу в плазмі вимірювали кожні 5 хв і підтримували змінною 20% інфузією глюкози. Середню швидкість екзогенної інфузії глюкози під час рівноважного стану (останні 30 хв) коригували на зміну глікемії та ділили на масу без жиру для оцінки чутливості до інсуліну.

Лабораторні заходи.

Наступні аналізи були зроблені на крові, взятій після нічного голодування. Глюкозу аналізували за допомогою Beckman Coulter DXC 600 Pro (Brea, CA) та інсуліну за допомогою імунологічного аналізу на Siemens Immulite 2000 (Siemens, Los Angeles, CA).

При біопсії.

Шкіру знеболювали сумішшю лідокаїну (2%) та бупівокаїну (0,025%). АТ отримували за допомогою голки з тупим кінцем, призначеної для ліпосакції (голка для ліпосакції "мерседес" діаметром 3 - 4 мм; MD Resource, Хейворд, Каліфорнія) та обробляли біля ліжка, промиваючи в PBS 37 ° C та заморожуючи або консервуючи у 10% формаліні для блокування парафіну. Біопсії, отримані від перших завершених 14 суб'єктів (8 жінок та 6 чоловіків), використовувались для наступних процедур.

Короткочасне вивільнення AT цитокінів.

Як було описано раніше (16), свіжий АТ збирали у попередньо газоване середовище 37 ° C 199, подрібнювали на фрагменти від 2 до 5 мг і промивали капроновою сіткою. Аликвоти інкубували протягом 3 год у середовищі 199, що містить 1% BSA, в атмосфері від 95% O2 до 5% CO2 у водяній бані, що струсає (60 циклів/хв, 37 ° C).