Довготривале введення дегідроепіандростерону прискорює катаболізм глюкози шляхом активації
Цзянь Кан
Ключова лабораторія фізіології та біохімії тварин Коледжу ветеринарної медицини Нанкінського сільськогосподарського університету, Нанкін, Китай
Чонг'ян Ге
Ключова лабораторія фізіології та біохімії тварин Коледжу ветеринарної медицини Нанкінського сільськогосподарського університету, Нанкін, Китай
Лей Ю
Ключова лабораторія фізіології та біохімії тварин Коледжу ветеринарної медицини Нанкінського сільськогосподарського університету, Нанкін, Китай
Longlong Li
Ключова лабораторія фізіології та біохімії тварин Коледжу ветеринарної медицини Нанкінського сільськогосподарського університету, Нанкін, Китай
Гаїтянська Ма
Ключова лабораторія фізіології та біохімії тварин, Коледж ветеринарної медицини, Нанкінський сільськогосподарський університет, Нанкін, Китай
Задумав і спроектував експерименти: HTM. Виконував експерименти: Й.К. Проаналізовано дані: CYG LY. Внесені реагенти/матеріали/інструменти аналізу: LLL. Написав папір: JK CYG.
Пов’язані дані
Усі відповідні дані містяться в роботі.
Анотація
Вступ
Ожиріння представляє дуже серйозну загрозу для здоров’я людини [1, 2], і воно пов’язане з низкою метаболічних захворювань, таких як хронічна діабетична гіперглікемія, цукровий діабет, гіпертонія та жирова хвороба печінки [3–6]. Ці хвороби вражають мільйони людей, які повинні ретельно контролювати рівень глюкози в крові, щоб запобігти ускладненням, пов’язаним з діабетом [6]. Збільшення споживання калорійної їжі та малорухливий спосіб життя є основними причинами ожиріння у людей у всьому світі [7]. На додаток до фізичних вправ корисними продуктами харчування та харчовими інгредієнтами може бути практичний спосіб контролю маси тіла та накопичення жиру [8]. Хоча численні дослідження були зосереджені на різних підходах до зменшення маси тіла та контролю накопичення жиру шляхом введення біоактивних сполук [9–12], останнім часом зростає стурбованість ожирінням, пов’язаним з глікометаболізмом [4, 5, 13, 14].
Дегідроепіандростерон (DHEA), природний стероїд, головним чином секретується корою надниркових залоз [15]. Однією з характеристик виробництва DHEA є його вікове виробництво [16]; його вікове зниження привернуло увагу щодо фізичного здоров’я [17, 18]. В даний час DHEA випускається у продажу як харчова добавка без рецепта [19]. Введення DHEA зменшує збільшення маси тіла та накопичення вісцерального жиру [11, 20]. Раніше наша лабораторія показала, що DHEA прискорює катаболізм ліпідів шляхом активації системи сигналізації cAMP-PKA [21], що призведе до експресії експресії відповідних генів [22]. Загальновідомо, що існує тісний взаємозв’язок між метаболізмом глюкози та метаболізмом жирів в організмі. Введення DHEA, потенційної терапії для схуднення та зменшення накопичення жиру, може бути практичним способом зменшення маси тіла та надмірного жиру у людей чи тварин. Однак мало інформації для оцінки того, чи регулює DHEA метаболізм глюкози, що, в свою чергу, вплине на масу тіла та відкладення жиру.
Отже, це дослідження було проведене для вивчення наслідків тривалого введення DHEA на метаболізм глюкози та його наслідки у щурів, які харчуються дієтою з високим вмістом жиру. Ця інформація поглибить наше розуміння механізмів, що зумовлюють DHEA, і підтвердить його як харчову добавку для контролю маси тіла та для припинення захворювань, пов’язаних із ожирінням.
Матеріали і методи
Тварини та дієтичне лікування
Вимірювання вмісту глюкози та глікогену в сироватці крові
Вміст глюкози в сироватці крові, печінкового глікогену та м’язового глікогену вимірювали за допомогою комерційних наборів відповідно до протоколів виробників (Інститут біотехнологій Нанкін Цзяньчен, Китай).
Вимірювання активності ключових ферментів під час глікометаболізму в печінці
Діяльність глюкокінази (GK), піруваткінази (PK), сукцинатдегідрогенази (SDH) та малатдегідрогенази (MDH) у печінці вимірювали за допомогою комерційних наборів згідно з протоколами виробників (Нанкінський інститут біотехнологій Цзяньчен, Китай). Діяльність піруватдегідрогенази (PDH, E1) та фосфофруктокінази-2 (PFK-2) у печінці вимірювали за допомогою наборів ІФА згідно з протоколами виробників (Shanghai Lengton Bioscience Co., Китай).
Вимірювання вмісту гормонів у сироватці крові
Вміст інсуліну та лептину в сироватці крові вимірювали за допомогою наборів для радіоімунологічного аналізу згідно з протоколами виробників (Пекінський північний інститут біотехнології, Китай). Внутрішні коефіцієнти варіації для всіх наборів для виявлення гормонів становили менше 10%, а інтерференційні коефіцієнти - менше 15%.
Визначення рівня мРНК гена, пов’язаного з метаболізмом глюкози, за допомогою ПЛР у режимі реального часу
Таблиця 1
| β-актин | > NM_031144 | GATTACTGCCCTGGCTCCTA | Вперед |
| TCATCGTACTCCTGCTTGCT | Зворотний | ||
| Pi3k | > NM_053481 | CGGCGTGACATGTAGGCTCTCA | Вперед |
| ACGGCCCGCACTGTAACCTAT | Зворотний | ||
| Акт | > NM_033230 | TCAGTAGCATCCGGCAATTATC | Вперед |
| TGCTCAATCAAAGCCACAGTC | Зворотний | ||
| Пепк | > NM_198780 | GCTGCCATGAGATCAGAGG | Вперед |
| AATCCGGGCCAGAGGAAC | Зворотний | ||
| Гіс2 | > NM_013089 | TGGCCTCCAGCAAGTCAT | Вперед |
| TGGGATGTGGTTCAGGGA | Зворотний | ||
| Inrs | > NM_017071 | GCAGAGACCCGTGTTGCGGT | Вперед |
| CCATCACTACCAGCATTGGCTGTCC | Зворотний | ||
| Насичення2 | > NM_012879 | TGCTGGAAGAAGCGTATCAG | Вперед |
| GGCCAAGTAGGATGTGCCAG | Зворотний | ||
| Насичення4 | > NM_012751 | TGTTGCGGATGCTATGGG | Вперед |
| CTGCGAGGAAAGGAGGGA | Зворотний | ||
| Irs2 | > AF087674 | CATCGTGAAGAAGGCATAGG | Вперед |
| GACCGGTGACGGCTGAACGG | Зворотний |