Евкаліптовий глобул (евкаліпт) Лікування кандидозу у звичайних та діабетичних щурів

Аліреза Накае

2 кафедра біохімії і

Біта Муді

3 Науково-дослідний центр клітинної та молекулярної біології, Медичний факультет, Університет медичних наук Захедан, Захедан;

Хоссейн Алі Хазай

4 кафедра імунології та гематології медичного факультету Медичного університету Захедан

Анотація

ВСТУП

Цукровий діабет - це складне захворювання, яке характеризується гіперглікемією і пов’язане з інсуліновою недостатністю або нечутливістю органів-мішеней до інсуліну. При цукровому діабеті високий рівень глюкози в крові викликає класичні симптоми поліурії, полідипсії, поліфагії та ускладнень діабету [1]. Цукровий діабет спричиняє різні дисфункції в організмі, включаючи судинні розлади, ретинопатію, кардіоміопатію, змінює функції імунітету, зміни функції кишечника, периферичну нейропатію та порушення функції центральної нервової системи [2]. Хворі на діабет також більш схильні до мікробних інфекцій, включаючи кандидоз.

У сучасній медицині досі не існує задовільної ефективної терапії для лікування цукрового діабету [3]. Синтетичні пероральні гіпоглікемічні препарати, такі як сульфонілсечовина та бігуаніди, мають небажані побічні ефекти або протипоказання [4]. Навіть інсулінотерапія має кілька недоліків, таких як резистентність до інсуліну, нервова анорексія, атрофія мозку та жирова печінка після хронічного лікування [5]. З тих самих причин продовжується пошук більш безпечних та ефективних препаратів рослинного походження для лікування діабету [6]. Етноботанічна інформація вказує на те, що понад 800 рослин використовуються як традиційні засоби для лікування діабету, але лише деякі з них пройшли науковий огляд [7].

Евкаліпт глобулус (евкаліпт) - це високе, швидко зростаюче вічнозелене дерево, родом з Тасманії та південно-східної Австралії. Він також росте в широкому діапазоні кліматичних умов і широко поширений по всьому Сістану та провінції Балучестан (Іран). Евкаліпт використовується як традиційне ліки для лікування цукрового діабету в Південній Америці, Африці та Ірані [7, 8]. Дослідження на моделях стрептозотоцинових діабетиків на тваринах підтвердили протигіперглікемічний [7, 8] та протизапальний [9] ефект евкаліпта.

Олія і листя евкаліпта використовують у лікувальних цілях. Евкаліптова олія використовується як антимікробний елемент у різних видах крему, мила та зубної пасти [10]. Лабораторні дослідження виявили, що евкаліптова олія містить речовини з сильними антибактеріальними та протигрибковими властивостями [12, 14]. Листя евкаліпта також містять речовини, що мають антибактеріальні властивості [15, 16].

Існує ймовірність того, що дієтичне введення евкаліпту може бути пов’язане зі зменшенням кандидозної колонізації у нормальних та діабетичних щурів. Наскільки нам відомо, немає даних щодо впливу дієти та питної води з добавками на евкаліпт на системний кандидоз у діабетичних щурів, індукованих стрептозотоцином. Отже, це дослідження було проведене для оцінки протикандідальних ефектів евкаліпта у нормальних щурів та хворих на цукровий діабет.

МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ

Тварини . Дослідження проводили на шістдесяти дозрілих нормоглікемічних самцях щурів-альбіносів (Rattus norvegicus) штаму Wistar вагою 200-250 г, розміщених окремо в клітках (по одній на клітку) з вільним доступом до води та їжі. Тварин утримували в приміщенні при 22 ± 2 ° С з фіксованим 12-годинним періодом штучного освітлення. Всім тваринам годували стандартний раціон для гризунів із таким складом (мас./Мас.): 20% білка, 3% жиру, 2% клітковини, 6% мінералів та 69% крохмалю та вітамінних добавок (Інститут Пастера Ірану, Тегеран). Це дослідження було схвалено Етичним комітетом Університету медичних наук Захедан (Захедан, Іран).

посадкові матеріали. Висушені листя евкаліпта були отримані з комерційного джерела. Листя гомогенізували до дрібного порошку і зберігали при кімнатній температурі (20 ± 2 ° С) до використання. Для раціону тварин евкаліптовий порошок був включений у подрібнений раціон щурів (62,5 г/кг), ретельно перемішаний, потім додана дистильована вода і змішана до жорсткої пасти [17]. Потім суміш гранули і сушили при 45 ° С до висихання. Контрольна дієта була підготовлена за тим самим методом, щоб переконатися, що наш спосіб складання дієти не змінює вітамінно-мінеральний вміст дієти. Водний екстракт евкаліпта (АЕЕ) готували шляхом 15-хвилинного відвару порошкоподібного матеріалу, як описано Грей і Флатт [17]. Коротко, 2,5 г порошкоподібного матеріалу поміщають у 100 мл дистильованої води, доводять до кипіння, потім виймають із джерела тепла і дають настоятися протягом 15 хв. Цю суспензію відфільтровували з ватману No 1 і об’єм доводили дистильованою водою до 100 мл. Щоб бути готовими до використання, аликвоти 10 мл АЕЕ розбавляли в 10 разів водопровідною водою (2,5 г/л).

Мікроорганізм. C. albicans (ATCC 10731) культивували при температурі 37 ° С протягом 24 годин на декстрозному агарі Сабуро (SDA). Морфологічні та біохімічні характеристики дріжджових клітин перевіряли мікроскопічними спостереженнями, колоніальною морфологією на SDA, утворенням зародкових зондів у сироватці, утворенням хламідоспор на агарі хламідоспори та реакціями ферментації цукру. Через 15 днів після індукції діабету щурам у групах II, III, V та VI інтраперитонеально інокулювали 0,2 мл 10 5 КУО (колонієутворююча одиниця) мл -1 суспензії організму в стерильний фізіологічний розчин [18]. Концентрацію Candida albicans підтвердили за допомогою серійного розливу SDA у планшети з 10-кратним розведенням вихідної суспензії.

Експериментальна індукція діабету. Щурам у групах IV - VI вводили свіжоприготований розчин стрептозотоцину (60 мг/кг маси тіла в 0,15 М NaCl зі 100 мМ буфером цитрату натрію, рН 4,5) [18]. Контрольних щурів (групи І-ІІІ) обробляли такою ж кількістю цитратного буфера без стрептозотоцину. Об’єм ін’єкції становив 1 мл/кг. Успішна індукція діабету була підтверджена шляхом вимірювання концентрації глюкози в крові натще у щурів через 48 годин після ін’єкції стрептозотоцину. Щурів з рівнем глюкози в крові натще> 180 мг/дл вважали діабетиком і включали в дослідження.