Клінічні та лабораторні прояви мутації гена протромбіну у жінок репродуктивного віку

А. П. Момот

1 Алтайське відділення FSBI, Національний дослідницький центр гематології, м. Барнаул, Росія

М. Г. Ніколаєва

2 Акушерсько-гінекологічний факультет з курсом додаткової професійної освіти ФГБУ вищої освіти Алтайського державного медичного університету, м. Барнаул, Росія

Н. Н. Ясафова

3 Алтайське відділення ФГБУ, Національний науковий центр гематології Міністерства охорони здоров'я Російської Федерації, м. Барнаул, Росія

М. С. Зайнуліна

4 Санкт-Петербурзький державний фінансований заклад, "Пологовий будинок № 6 імені професора В.Ф. Снегірєва ”, кафедра акушерства, гінекології та репродуктивної медицини, Перший Санкт-Петербурзький державний медичний університет, Санкт-Петербург, Росія

К. А. Момот

І. А. Тараненко

Анотація

Мета дослідження

Дослідити зв'язок активності протромбіну (фактор II) з урахуванням мутації протромбіну G20210A з його клінічними проявами як тромботичні ускладнення.

Матеріали і методи

Проведено проспективне клінічне когортне дослідження 290 жінок репродуктивного віку. Визначено дві когортні групи: дослідну групу із 140 пацієнтів з мутацією протромбіну G20210A генотипу та контрольну групу 150 жінок з генотипом G20210G.

Результати

Карета мутації протромбіну G20210A пов'язана з ризиком тромботичних ускладнень порівняно з диким типом G20210G (RR = 17,1; p Ключові слова: мутація гена протромбіну, мутація протромбіну G20210A генотип, венозні та артеріальні тромбози, активність протромбіну

Вступ

Незважаючи на значний прогрес у клінічній практиці та фармакології, тромботичні події будь-якої локалізації залишаються основною причиною смертності та інвалідності в розвинених країнах і становлять глобальну медичну та соціальну проблему1,2. Встановлено, що 6–20% підтверджених тромботичних подій обумовлені мутацією протромбіну G20210A, 3–5, яка характеризується автосомно-домінантним успадкуванням і проявляється в заміні нуклеотиду гуаніну (G) нуклеотидом аденіну (A) у положенні 20210. Через підвищену незначну експресію гена рівень та активність протромбіну, кодованого геном, може бути в 1,5–2 рази вище норми.3 Протромбін, або фактор II, відноситься до факторів згортання крові, що залежать від вітаміну К, будучи попередником ключа коагуляційний фермент, тромбін. 6,7

Мутація протромбіну G20210A виявлена у 1–6% населення, 8,9 збільшуючи ризик венозного тромбозу на 2–4,10

Як дійшли висновку експерти, гетерозиготний носій мутації протромбіну G20210A розглядається як фактор “низького ризику” розвитку венозних тромбоемболічних ускладнень (VTEC), 11–14 встановлюючи ізольований відносний ризик тромботичних ускладнень як OR = 2–3,15, 16 Однак, з урахуванням додаткових факторів, величина тромбогенного ризику значно варіюється. Повідомляється, що комбіновані гормональні контрацептиви (КГК) збільшують ризик венозних тромбоемболічних ускладнень (ВТЕК) для носіїв мутації протромбіну G20210A на 16,17–20, а гормональна терапія в клімактеричному періоді збільшує ризик ТГВ на 2–4,19,21–23. це, ряд авторів показали, що ризик розвитку VTEC під час вагітності та після пологів у пацієнтів з мутацією протромбіну G20210A становить АБО 3–15 порівняно з часом поза вагітністю.

Таким чином, ризик тромбозу у носіїв мутації протромбіну G20210A можна вважати кумулятивним і залежати від тимчасових (відносно контрольованих) факторів, таких як вагітність та введення естрогену, що містять ліки.27 Проте, незважаючи на статистично значущу зв'язок між мутацією протромбіну G20210A та ризик тромбозу при встановленні додаткових факторів ризику (введення ХГС, МГТ та вагітність), неможливо передбачити ймовірність тромботичних подій.

Раніше ми провели дослідження, спрямоване на вивчення зв'язку між фенотипом лабораторії мутацій Лейдена та ризиком тромбозів у жінок репродуктивного віку. 28,29 Дослідження тривало 9 років і включало динамічне спостереження когорти 500 FV Leiden G1691A (FVL G1691A) носії мутації. Встановлено, що у соматично здорових пацієнтів генотип FVL G1691A не впливав на ризик тромбозів і був порівнянним з таким у звичайних хворих на зиготу [RR 1,5; 95% ДІ 0,03–76,5; р = 0,8269]. З додатковими факторами ризику (супутні захворювання, травми, ХГС, вагітність) ризик VTEC становив 9,3 [RR 9,3; 95% ДІ 4,7–18,5; р 0,05) та етнічної приналежності: досліджувана група становила 92,9% кавказької раси, контрольна група - 91,9% кавказької раси (р> 0,05). Період спостереження для обох груп становив не менше 6 років.

Критерії включення до дослідницької групи:

Каретка мутації протромбіну G20210A (GenBank 176930.0009);

Від 18 до 45 років.

Критерії включення контрольної групи були такими ж, як і для досліджуваної групи, але пацієнти не були носіями мутації протромбіну G20210A.

Критерії виключення з навчальної групи:

аутоімунні захворювання, включаючи антифосфоліпідний синдром;

фактор V мутація Лейдена (GenBank 612309.0001);

зниження функціональної активності антитромбіну III, білків С або S.

Дослідження було схвалено місцевим комітетом з етики ФСБІ ВО ВНЗ АМНУ МОЗ Росії (протокол №5 від 25.06.12). Відповідно до нещодавнього перегляду Гельсінкської декларації Всесвітньої медичної асоціації, перед дослідженням всі жінки дали свою поінформовану згоду на використання їх біологічного матеріалу.

Наявність мутації протромбіну G21210A було виявлено методом ПЛР з використанням реагентів компанії Litekh (Росія). Матеріалом дослідження була геномна ДНК людини, виділена з лейкоцитів периферичної крові. Аналіз базувався на методі полімеразної ланцюгової реакції в режимі реального часу (ПЛР у реальному часі) з використанням конкуруючих зондів TagMan, комплементарних поліморфним ділянкам ДНК. У всіх пацієнтів активність протромбіну перевіряли з використанням дефіцитної у факторі II плазми, реагенту Tromborel S та автоматичного коагулометра BCS XP (Siemens, Німеччина). Активність протромбіну у пацієнтів досліджуваної групи тестували 3–9 разів протягом усього періоду спостереження. У випадку пацієнтів з VTEC враховувався результат до тромбозу.