Лабораторні дослідження на дефіцит антитромбіну - Khor - 2010 - Американський журнал гематології - Wiley

Відділення патології, Масачусетська загальна лікарня, Бостон, Массачусетс.

Коагуляційна лабораторія, Масачусетська загальна лікарня, Грей-Джексон 235, 55 Фрут-стріт, Бостон, MA 02114 Шукати інші статті цього автора

Відділення патології, Масачусетська загальна лікарня, Бостон, Массачусетс.

Конфлікт інтересів: нічого не повідомляти.

Анотація

Вступ

Антитромбін - природний антикоагулянт, який циркулює в плазмі у концентрації 112–140 мг/л із періодом напіввиведення від двох до трьох днів [7]. Це інгібітор серинової протеази (серпін), який інгібує не тільки тромбін та фактор Ха, але також фактори IXa, XIa, XIIa, калікреїн та плазмін [7]. Як і інші серпіни, антитромбін діє як інгібітор суїцидального субстрату, ковалентно зв’язуючи та інактивуючи тромбін [7]. Активність антитромбіну значно прискорюється взаємодією з сімейством гепарансульфатів глікозаміногліканів, включаючи гепарин [12]. In vivo гепарансульфат виявляється на поверхні ендотеліальних клітин, таким чином локалізуючи антитромбінову активність [12]. Взаємодія антитромбіну з гепарансульфатом на поверхні ендотеліальних клітин також призводить до вивільнення простацикліну, інгібітора тромбоцитів [13].

Значний прогрес був досягнутий у розумінні молекулярного механізму активності антитромбіну. Ген, що кодує антитромбін, SERPINC1, містить 7 екзонів, що охоплюють 13,5 kb на хромосомі 1. МРНК 1392 bp кодує 432 амінокислоти, 58 кДа глікопротеїну, який містить 3 β-аркуші та 9 α-спіралей з ділянкою активного центру та сайтом зв’язування гепарину (HBS) [3] . Гепарин зв'язується з D-спіраллю антитромбіну, оголюючи реактивний центр антитромбіну та прискорюючи його інгібуючу активність у 1000 разів. Хоча інгібування тромбіну вимагає утворення тримолекулярного комплексу між антитромбіном, тромбіном і гепарином довшим за 18 сахаридів (включаючи певну послідовність пентасахаридів), інгібування фактора Ха антитромбіном може прискорюватися лише за допомогою пентасахариду гепарину [7, 12 ].

Існує два основних типи аналізів на антитромбін - активність (функціональна) та антиген (імуноаналіз). Антигенні аналізи - це імуноаналізи, призначені для вимірювання кількості білка незалежно від здатності білка функціонувати. Оскільки рівень антигену часто є нормальним при дефіциті типу II, натомість для первинного тестування слід використовувати аналізи активності. Якщо результат знижується, можна розглянути антигенний аналіз для визначення підтипу дефіциту. Дефіцит антитромбіну можна розділити на два типи: кількісний (тип I) або якісний (тип II). Недоліки I типу характеризуються зниженою активністю антитромбіну та рівнем антигену; типово обидва нижче 70% [3], хоча також спостерігались значення до 78–80% (неопубліковані спостереження). Недоліки типу II - це якісні дефекти, що призводять до утворення варіантного білка зі зниженою функцією.

Недоліки типу II можна додатково розділити на три підтипи: реактивний ділянку (RS), сайт зв'язування гепарину (HBS) та плейотропні дефекти (мутації, скупчені в області, яка називається s1C ‐ s4B) [3, 14]. І мутації HBS і RS типу II пов'язані зі зниженням активності та нормальним рівнем антигену; однак лише мутації HBS типу II пов'язані з прогресивною активністю (див. нижче) [3, 15]. Плейотропні дефекти типу II пов’язані з помірним зниженням як антитромбінової активності, так і рівня антигену (зазвичай антитромбінова активність нижча за рівень антигену) із генетичною мутацією в s1C ‐ s4B області [3, 16]. Зниження рівня антигену може бути зумовлене комбінацією факторів, включаючи зменшення синтезу та секреції, а також збільшення катаболізму [7]. Клінічно мутації HBS ІІ типу зустрічаються у загальній популяції приблизно на 0,03–0,04% і пов’язані з низьким ризиком тромбоутворення у гетерозиготних носіїв [15, 17, 18]. Це підвищує ймовірність того, що може бути корисно відрізнити дефекти HBS від інших дефектів типу II.