Порівняльне дослідження антиоксидантної активності сироватки крові людини амперометричним методом,
Євген Плотніков
1 Томський політехнічний університет, Томськ, Росія
Олена Короткова
1 Томський політехнічний університет, Томськ, Росія
Олеся Воронова
1 Томський політехнічний університет, Томськ, Росія
Наталія Сажина
2 Інститут біохімічної фізики Емануеля, Москва, Росія
Катерина Петрова
1 Томський політехнічний університет, Томськ, Росія
Антон Артамонов
3 Фламена Лтд, Москва, Росія
Людмила Чернявська
4 Сибірський державний медичний університет, Томськ, Росія
Олена Дорожко
1 Томський політехнічний університет, Томськ, Росія
Анотація
Вступ
Аналіз крові може надати важливу інформацію про функціональний стан антиоксидантної системи. Порушення роботи цієї системи збільшує концентрацію вільних радикалів і може спричинити окислювальний стрес. Труднощі в оцінці окисного стресу полягає у відсутності універсального методу визначення антиоксидантної активності (АОА) компонентів крові через їх різну природу.
Матеріал і методи
Об'єктами дослідження були сироватки 30 пацієнтів чоловічої статі з діагнозом синдром алкогольної залежності та здорові донори. Порівняльне дослідження загальної антиоксидантної активності (TAA) сироватки крові людини проводили вольтамперометричним (VA), амперометричним (AM) та хемілюмінесцентним (HL) методами.
Результати
Всі застосовані методи виявили, що сироватковий TAA у хворих на алкоголізм нижчий, ніж TAA у здорових донорів (контрольна група); за амперометричним методом середнє значення сироваткового TAA становило 850 ± 210 нА × с та 660 ± 150 нА × с для здорових донорів та алкоголіків відповідно (p Ключові слова: загальна антиоксидантна активність крові, алкоголізм
Вступ
Аналіз крові надає вичерпну інформацію про внутрішні умови та процеси. Одним із важливих параметрів є функціональний стан антиоксидантної системи. Порушення роботи цієї системи підвищує концентрацію вільних радикалів (супероксид-аніонний радикал та гідропероксидний радикал, гідроксильний радикал та ін.), Надлишок яких викликає окислювальний стрес і бере участь у патогенезі ряду захворювань [1–3]. У свою чергу, хвороби, фактори навколишнього середовища та стрес призводять до того, що природна антиоксидантна система організму не здатна ефективно нейтралізувати радикали, що спричинює більш сильний окислювальний стрес. Однак різні біологічні фактори, а також різні методи аналізу призводять до значних змін у виявлених параметрах крові антиоксидантної системи. Труднощі в оцінці окисного стресу полягає у відсутності універсального методу визначення антиоксидантної активності компонентів крові через їх різну природу. Огляд [4] показав низьку кореляцію між найбільш відомими методами оцінки антиоксидантної активності, що дозволяє говорити лише про якісні характеристики результатів аналізу.
Метою даної роботи було провести порівняльну оцінку загальної антиоксидантної активності (TAA) крові сироватки людини в здорових умовах та при патології (синдром алкогольної залежності) амперометричним, хемілюмінесцентним та вольтамперометричним методами. Алкоголізм, як правило, характеризується психічною та фізичною залежністю від етанолу, що пов'язано зі зміною біохімічних показників у крові пацієнта. Загальну концентрацію сполук тіолу визначали в тих самих зразках, як додатковий параметр, який також описує стан антиоксидантної системи.
Матеріал і методи
Об'єктом дослідження була сироватка 30 пацієнтів чоловічої статі з діагнозом синдром алкогольної залежності. Усі пацієнти знаходились під медичною допомогою в Томській обласній психіатричній лікарні. Як контрольну групу використовували сироватку крові здорових донорів.
Попередня обробка зразків крові
Венозну кров, зібрану натще, поміщали в скляну пробірку для центрифуги без антикоагулянта і залишали при кімнатній температурі на 30 хв, щоб забезпечити утворення згустку, який негайно видаляли. Пробірки центрифугували в настільній центрифузі протягом 10 хв при швидкості обертання 2000 об/хв. Для подальшого вивчення відібрали центрифугат в обсязі 1,0–1,5 мл.