Постійна асоціація - огляд тем ScienceDirect

Пов’язані терміни:

  • Антиген
  • Антитіла
  • Білок
  • рН
  • Постійна дисоціації
  • Вуглекислий газ
  • Ліганд

Завантажити у форматі PDF

Про цю сторінку

Загальні принципи ендокринології

Крива титрування

Наведений вище аналіз Скатчарда використовував константу асоціації, K, як один із дескрипторів реакції зв'язування. Як зазначалось вище, константа асоціації має одиниці виміру M −1. Константа дисоціації, Kd, ​​є оберненою до константи асоціації з одиницями М. Для випадку єдиного набору невзаємодіючих сайтів з однаковим K запишемо:

крива титрування є графіком B проти log [L]. Це аналогічно лужному титруванню кислоти, при якому кількість доданого сильного лугу (NaOH) відкладається в залежності від рН. Крива має S-подібну форму. Його максимальний нахил виникає, коли [L] = Kd. Щоб побачити це, ми диференціюємо рівняння (9.1.A1.17) щодо log [L]:

де ν - частка насичення, визначена рівнянням (9.1.A1.7), діапазон якого обмежений значеннями від 0 до 1,0. З цього відношення видно нахил кривої титрування, який дорівнює нулю, коли ν = 0 і коли ν = 1,0, і має максимум, коли ν = 0,5. Максимальний нахил відбувається в точці перегину в S-подібній кривій. Точку перегину при ν = 0,5 можна отримати, встановивши другу похідну B проти log [L] рівною нулю. Коли ν = 0,5, з визначення ν, [L] = 1/K = Kd; це точка, в якій концентрація вільного ліганду дорівнює константі дисоціації для сайтів. Приклад кривої титрування наведено на малюнку 9.1.A1.2 .

огляд

Малюнок 9.1.A1.2. Крива прив'язки титрування з Bmax = 4 і Kd = 0,5.

Корисність кривої титрування полягає в тому, що вона дозволяє представити всі дані зв'язування в одному графіку, і це візуально дозволяє судити про важливий момент: чи включають дані зв'язування значення B як вище, так і нижче 0,5 Bmax? Це важливий контроль якості при визначенні, чи відповідають дані прив'язки завданням характеристики Kd та Bmax. Якщо точка перегину не визначена чітко, як можна на кривій титрування передбачити, де зв'язування вирівняється до Bmax? І Kd, і Bmax найкраще визначати, коли є дані B, [L], взяті вище і нижче ν = 0,5. (Див. І. М. Клоц, Кількість рецепторних місць на графіках Скечарда: факти та фантазії. Наука 217: 1247–1249, 1982).