Вивчення ефекту проти ожиріння через пригнічення активності ліпази підшлункової залози Diospyros kaki
Гьо-Нам Кім
1 Департамент харчової науки та біотехнологій, Університет Кюнгнам, Кьонсангнам-до 51767, Республіка Корея
Мі-Рае Шін
2 Коледж корейської медицини, Університет Тегу Хаані, Кьонсан 38610, Республіка Корея
Сун Хо Шін
2 Коледж корейської медицини, Університет Тегу Хаані, Кьонсан 38610, Республіка Корея
Ах Реум Лі
2 Коледж корейської медицини, Університет Тегу Хаані, Кьонсан 38610, Республіка Корея
Джу Янг Лі
2 Коледж корейської медицини, Університет Тегу Хаані, Кьонсан 38610, Республіка Корея
Бу-Іль Сео
2 Коледж корейської медицини, Університет Тегу Хаані, Кьонсан 38610, Республіка Корея
Мін Йонг Кім
2 Коледж корейської медицини, Університет Тегу Хаані, Кьонсан 38610, Республіка Корея
Тае Хун Кім
3 Департамент харчових наук та біотехнологій, Університет Тегу, 201 Daegudae-ro, Gyeongsangbuk-do 712-714, Республіка Корея
Чон Сук Но
4 Департамент харчової науки та харчування, Університет Тонмён, Пусан 48520, Республіка Корея
Людина Хі Рі
5 Коледж ветеринарної медицини, Національний університет Кюнгпук, Тегу 41566, Республіка Корея
Сон-Су Ро
2 Коледж корейської медицини, Університет Тегу Хаані, Кьонсан 38610, Республіка Корея
Анотація
Ліпаза підшлункової залози є ферментом, відповідальним за перетравлення і всмоктування тригліцеридів, оскільки її пригнічення є одним із найбільш широко вивчених методів, що застосовуються для визначення потенційної активності природних продуктів для пригнічення поглинання жиру в їжі. Зменшення споживання енергії з харчових жирів за рахунок пригнічення цього ферменту може бути чудовою стратегією для профілактики та лікування ожиріння. Інгібуючу активність на фермент ліпази підшлункової залози плодів діоспіроса какі та екстракту шкірки цитрусового нешиу (PCM) оцінювали in vitro та вивчали його ефекти проти ожиріння на основі аналізу показників ліпідів у сироватці крові на мишах з високим вмістом жиру (HFD-). in vivo. PCM вводили перорально у дозі 50 і 200 мг/кг маси тіла протягом 6 тижнів. Крім того, активність панкреатичної ліпази оцінювали за допомогою орлістату (позитивний контроль). PCM виявляв інгібуючий ефект на активність ліпази зі значенням IC50 507,01 мкг/мл. Більше того, триацилгліцерин у сироватці крові, загальний рівень холестерину та маса вісцерального жиру були значно знижені порівняно з контрольними мишами HFD у мишей, оброблених PCM 200 мг/кг (p рівень LDL-холестерину m g/d L = TC - холестерин HDL - TG 5 .
2.4. DPPH Радикальна активність PCM
Визначення антиоксидантної активності PCM проводили методом вилучення радикалів DPPH за методом Park et al. [24]. 100 мкл етанольного розчину PCM (пробіл: 100 мкл етанолу) додавали до 100 мкл етанольного розчину DPPH (60 мкМ) за допомогою 96-лункового планшета. Аскорбінову кислоту (стандартний зразок) готували для восьми концентрацій (0,5, 1, 2, 5, 10, 20, 50 та 100 мкг/мл). PCM готували для шести концентрацій (5, 10, 20, 50, 100 та 200 мкг/мл). Реакційну суміш інкубували в темряві при 25 ° С протягом 30 хв. Оптичну щільність визначали, використовуючи пристрій зчитування мікропланшетів нескінченний M200 PRO (Tecan, Австрія). Суміш вимірювали спектрофотометрично при 540 нм. Антиоксидантну активність кожного зразка виражали через IC50 (мікромолярна концентрація, необхідна для інгібування утворення радикалів DPPH на 50%, розрахована з кривої інгібування log-дози). Активність поглинання радикалів розраховували у відсотках, використовуючи таке рівняння:
2.5. ABTS - радикальна активність PCM
Активність поглинання радикалів ABTS різних екстрактів вимірювали згідно модифікованого методу Re et al. [25]. Вихідний розчин ABTS розчиняли у воді до концентрації 7,4 мМ. Катіон радикалу ABTS (ABTS) отримували шляхом взаємодії вихідного розчину ABTS з 2,45 мМ персульфатом калію і дозволяючи суміші стояти протягом 14 годин при кімнатній температурі в темряві. Розчин ABTS розбавляли етанолом для отримання поглинання 0,70 ± 0,02 при 750 нм. Після додавання 95 мкл розведеного розчину ABTS (750 нм = 0,70 ± 0,02) до 5 мкл зразка суміш залишали при кімнатній температурі на 15 хв у темряві. Поглинання при 750 нм вимірювали, використовуючи пристрій зчитування мікропланшетів нескінченний M200 PRO (Tecan, Австрія). Заготовку готували таким же чином, за винятком того, що замість зразка використовували дистильовану воду. Активність поглинання радикалів розраховували у відсотках, використовуючи таке рівняння: