Біологічні ефекти продуктів переробки винограду з поліфенолів при експериментальному метаболічному синдромі
Критеріями РС були: абдомінальне ожиріння, гіперглікемія, гіперхолестеринемія та тенденція до зниження ліпопротеїдів високої щільності [16].
Щурів приносили в жертву під наркозом хлороформу відповідно до Міжнародних рекомендацій з біомедичних досліджень з використанням тварин (1985) та Правил лабораторної практики в Російській Федерації (Протокол № 267 Міністерства охорони здоров'я Російської Федерації, 19 червня 2003 р. ). Експерименти проводились відповідно до дозволу Вченої ради Кримського медичного інституту (Закон № 103 від 30.11.77 р.). Утримання тварин було затверджено Інституційним комітетом з біоетики та відповідає Керівним принципам по догляду та використанню лабораторних тварин, опублікованим NIH США (№ 85-23, переглянутий 1985).
Поліфеноли, використані в дослідженні
В якості продуктів переробки винограду з поліфенолу у дозі 2,5 мл/кг (0,05 мл на кожну тварину) використовувались “Enoant”, “Enoant-premium” та “Fenocor” (ТОВ “RESSFUD”, Ялта, Росія). Дозування вводили разом з 0,05 мл води щодня перорально через зонд протягом 4 тижнів після 5-го тижня розвитку РС.
За даними фітохімічних досліджень оксибензойні кислоти та флавоноїдні поліфеноли у складі “Enoant”, “Enoant-premium” та “Fenocor” переважно представлені галовою кислотою, катехолом, епікатехіном, кверцетином та проціанідинами, представленими в Таблиці 1 [17, 18].
Вибір названих продуктів переробки винограду (GPP) був натхненний деякими обставинами. Нещодавно було показано, що поліфенольна антиоксидантна активність концентрату «Фенокор» внаслідок придушення перекисного окислення ліпідів та окисної модифікації білків призводить до блокування окисного стресу - важливого патогенетичного механізму пошкодження клітинної мембрани при гістотоксичній гіпоксії [19]. У той же час, існує меншість сучасних досліджень щодо корекції складних порушень, таких як РС, за допомогою GPP з червоного винограду. У дослідженні [20] обговорюються деякі позитивні ефекти білих вин при РС. Однак не досліджувалося, як вони впливають на метаболічні параметри при РС, що було б корисно для корекції пацієнтів з названим діагнозом. Крім того, сучасні дані доводять, що поліфеноли починають ефективно діяти з концентрації 20 г/л [21-23], тоді як використовувані білі вина містять лише від 1,70 до 0,44 г/л поліфенолів. Ось чому дослідження комплексного впливу поліфенолів червоного винограду сьогодні стають надзвичайно важливими.
Морфологічні методи
Як в контрольній, так і в експериментальній групах вимірювали масу тіла та окружність живота для підтвердження абдомінального ожиріння. Крім того, вагу печінки та нирок, морфологічне дослідження названих органів проводили після евтаназії тварини.
Біохімічні аналізи
У глюкозі та основному рівні холестерину в сироватці крові вимірювали рівні ліпопротеїдів та тригліцеридів високої щільності для підтвердження РС.
Також вимірювання маркерів вільнорадикального окислення та антиоксидантів, а також маркерів запалення (неспецифічні протеїнази та їх інгібітори) проводили в сироватці крові та гемолізатах: