Вивчення антиуролітичних ефектів аюрведичної рецептури Гокшураді в

Амол Л. Ширфуле

1 Науково-дослідний центр харчової та лікарської токсикології, Національний інститут харчування, Хайдерабад, 500007, Індія

Венкатеш Рачарла

2 Кафедра фармакології, Фармацевтичний коледж CMR, Хайдерабад 500007, Індія

S. S. Y. H. Qadri

3 Патологічний відділ, Національний інститут харчування, Хайдерабад 500007, Індія

Арджун Л. Хандаре

Анотація

1. Вступ

Сечокам’яна хвороба оксалату кальцію стала проблемою, що зростає у багатьох країнах через географічні/генетичні зміни та сучасний спосіб життя. Люди, які живуть в посушливій і посушливій місцевості, страждають більше від гіперпоглинання кишечника оксалату кальцію, що призводить до каменів у нирках. За підрахунками, 12% світового населення страждають від каменів у нирках із частотою рецидивів від 70 до 80% у чоловіків та від 47 до 60% у жінок [1, 2]. Камені, що містять кальцій, є найбільш поширеними, що складають близько 75% усіх сечових каменів, які спостерігаються у формі чистого оксалату кальцію (50%) або фосфату кальцію (5%) та їх суміші (45%). Багато факторів впливають на ріст сечових каменів, в яких мінеральний обмін відіграє важливу роль [3].

Хоча GPF добре визнаний в традиційній індійській медицині як такий, що має антиуролітичну дію, але жодних наукових даних не опубліковано, що підтверджують його основний механізм дії на камені оксалату кальцію. Тому це дослідження було запропоновано для визначення терапевтичного потенціалу та механізму дії водних екстрактів із цього препарату при лікуванні сечокам’яної хвороби за допомогою методів in vitro та in vivo.

2. Матеріал і методи

2.1. Хімічні речовини та реактиви

Усі використовувані хімічні речовини були аналітичного класу. Етиленгліколь, тимол, відновлений глутатіон, 5-5′-дитиобіс, 2-нітробензойна кислота, тіобарбітурова кислота, фуросемід, H2O2, трихлороцтова кислота, 1,1,3,3, -тетраетоксипропан та гуанідин гідрохлорид були отримані від Sigma Chemical Company, Сент-Луїс, Міссурі, США. Реагентами, що використовувались для гістологічних препаратів, були розчинний у спирті еозин, гематоксилін та ксилол від Himedia Chemical Limited, Бомбей, Індія. Набори, використані в цьому дослідженні для визначення кальцію, магнію, азоту сечовини крові (BUN), креатиніну, супероксиддисмутази, глутатіонпероксидази, оксалату та цитрату, були придбані у Spinreact, Німеччина, та Ambika diagnostika, Індія.

2.2. Рослинні матеріали

Рослини, що використовувались для рецептури, були зібрані з місцевих лісів району Нандед, штат Махараштра, Індія, та засвідчені експертами. Зразки ваучерів були здані в гербарій Школи наук про життя S.R.T.M. Університет, Махараштра, Індія. Відповідні частини кожної рослини, як згадано раніше, збирали, а потім висушували в тіні. Висушені деталі очищали від сторонніх речовин, а потім подрібнювали до подрібненого порошку в млинку.

2.3. Стандартний препарат

У цьому дослідженні в якості стандартного препарату використовували полігонову форму цистону від Himalaya Drug Co., Бангалор, Індія. Препарат містив Didymocarpus pedicellata, Saxifraga ligulata, Rubia cordifolia, Cyperus scariosus, Achyranthes aspera, Onosma bracteatum, Vernonia cinerea, очищений Shilajeet та Hajrul Yahood Bhasma.

2.4. Антиоксидантний ефект in vitro

Антиоксидантний ефект GPAE визначався активністю знешкодження вільних радикалів та інгібуючими ефектами перекисного окислення ліпідів. Готували 0,1 мМ розчин радикалу DPPH у метанолі, і 1 мл цього розчину додавали до 3 мл GPAE при різних концентраціях для визначення активності знешкодження вільних радикалів [22]. Розчини інкубували протягом 30 хв при кімнатній температурі, а потім вимірювали абсорбцію при 517 нм. Зменшення абсорбції розчину DPPH розглядалося як збільшення активності вилучення DPPH радикалів. Ця активність визначається як% вилучення радикалів DPPH, яке розраховували у рівнянні з використанням розчину DPPH як контролю.

Інгібуючу активність перекисного окислення ліпідів визначали в ізольованих нирках щурів, які були електрично гомогенізовані в крижаному 50 мМ сольовому розчині фосфатного буфера (PBS) і доведені до рН 7,4. Гомогенат обробляли далі, а інгібуючу активність перекисного окислення ліпідів визначали за повідомленням методу [23]. Коефіцієнт інгібування розраховували за формулою, наведеною для активності знешкодження вільних радикалів.

2.5. Дослідження in vivo

2.5.1. Тварини

Догляд за тваринами та поводження з ними відповідали міжнародно прийнятим стандартним рекомендаціям щодо використання тварин, а протокол був схвалений інституційним комітетом з етики тварин (номер IAEC P25/7-2011/GBR) при Національному інституті харчування, Хайдерабад, Індія . Щури Wistar (180–220 г) будь-якої статі, використані для цього дослідження, були отримані та розміщені в Національному центрі лабораторних наук про тварин, Хайдерабад, Індія, і утримувались у пластикових клітках (47 см × 34 см × 18 см) з пиловим пилом. (поновлюється через кожні 48 год.), при контрольованій температурі 23–25 ° C та 12 год. циклу світло-темрява. Тваринам давали стандартну дієту на чау-чау, доступну в центрі. Тварини мали вільний доступ до їжі та води ad libitum протягом усього дослідження, за винятком 24 годин до та протягом 6 годин сечогінного дослідження, а під час збору зразків сечі за 24 години їжу вилучали.