Дослідження механізму адипокіну в безалкогольній жировій печінці у щурів, які отримували лікування чотирма травами
Інформація про статтю
Вей Вей, відділення гастроентерології, лікарня Ванцзин Китайської академії китайських медичних наук, № 6 центральної південної дороги Ванцзин, район Чаоян, Пекін, 100102, Китай. Електронна адреса: [електронна пошта захищена]
Анотація
Метою дослідження є визначення пов'язаного з адіпокіном механізму ефективності відвару Si He (SHD) для лікування неалкогольної жирової хвороби печінки (NAFLD). Сорок п'ять щурів Sprague-Dawley (SD) були випадковим чином розділені на контрольну групу, модельну групу, групу низьких доз SHD, групу середніх доз SHD та групу високих доз SHD. Крім контрольної групи, інші отримували дієту з високим вмістом жиру протягом 12 тижнів для встановлення моделі. Потім проводили фарбування H&E та олійно-червоним O, а для визначення рівня експресії молекул, пов’язаних з адипокіном, використовували імуноферментний аналіз (ELISA). Результати H&E та олійно-червоного фарбування O показали, що лікування SHD для НАЖХП може ефективно покращити патологічні стани печінки порівняно з типом у групі моделей, і найкраща ефективність спостерігалась у групі високих доз SHD. Порівняно з модельною групою, лікування SHD могло ефективно знизити рівень експресії фактора некрозу пухлини-альфа (TNF-α) та інтерлейкіну-6 (IL-6), а також підвищити рівень експресії вісфатину, адипонектину (APN), лептину (LEP), і резистин у щурів NAFLD. SHD може поліпшити NAFLD за допомогою декількох засобів націлювання на адипокіни.
Вступ
Матеріали і методи
Дослідні тварини
У цьому дослідженні було використано 45 чистокровних здорових самців щурів Sprague-Dawley (SD) (специфічного без патогенів (SPF), середня вага тіла = 180 ± 10 г). Ці щури були придбані у Пекінської лабораторії VitalRiver Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (ліцензія № SCXK (Пекін) 2012-0001) та вирощені в Експериментальному центрі для тварин лікарні Дунжимен Пекінського університету китайської медицини. До цих експериментів цих щурів SD годували в експериментальному центрі протягом 1 тижня для адаптації до навколишнього середовища.
Дієта з високим вмістом жиру
Дієта з високим вмістом жиру SPF була придбана у компанії Beijing Keaoxieli Feed Co., Ltd. (ліцензія № SCXK (Пекін) 2009-0012). Дієта з високим вмістом жиру (10 кг на упаковку) складалася з 88% звичайних кормів, 2% холестерину та 10% сала, яке стерилізували кобальтом 60 і зберігали при кімнатній температурі.
Традиційна китайська медицина
Рецепт TCM, Si He Decoction (SHD), був придбаний в аптеці лікарні Ванцзін Китайської академії наук традиційної китайської медицини, який готували для відвару в кімнаті для декорування трав і тестували на обсяг, питому вагу, та гігіологія. Рідкі ліки в 1 мл еквівалентні 2 г сирого препарату. Інгредієнти SHD були наступними: 10 г Bupleurum, 10 г Fructus Aurantii, 30 г східного полину, 9 г гарденії, 6 г готового ревеню, 30 г кореневища східного подорожника, 15 г смаженого Atractylodes macrocephala, 9 г Пінелія, 9 г Магнолія лікарська, 20 г насіння кої, 6 г круглих насіння кардамону, 15 г тальку, 12 г мандаринової цедри, 9 г кореневища чуансіонга, 12 г кореневища горіхової трави, 20 г смаженого Radix Paeoniae Alba і 6 г солодки.
Основні реагенти
Формальдегід (Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.), 10% хлоралгідрат, ксилол, еозин та гематоксилін (Beijing Chemical Reagent Co., Ltd.), олійно-червоний O (Sigma) та фізіологічний розчин (Beijing Double-Crane Pharmaceutical Co., Ltd.). Крім того, набір імуноферментного аналізу (ELISA) для вісфатину щурів (синя основа), APN щурів та LEP, набір ELISA для резистину щурів (Senxiong Technologies) та набори ELISA для фактора некрозу пухлини щурів-альфа (TNF-α) та інтерлейкін-щур-6 (IL-6) (Пекін Huanya Tektronix Biomedical Technology Co. Ltd.) також використовувались.
Основні інструменти
Основними інструментами, що використовувались, були автоматична машина для вбудовування парафіну, ультратонкий напівавтоматичний мікротом, заморожуючий мікротом (Leica), мікроскоп та відповідна система фотозйомки (Olympus), криогенний холодильник –80 ° C (Sanyo), електронні ваги (Shanghai Second Balance Instrument Factory), повністю автоматичний багатофункціональний зчитувач мікропланшетів (ThermoFisher), інкубатор з постійною температурою (інструмент Tianjin TAISITE) та стіл для струшування (QILINBEIER).
Експериментальні методи
Експериментальний протокол суворо дотримувався основних експериментальних принципів (рандомізація, контроль та повторюваність) і був затверджений Комітетом з етики лікарні Дунджімен Пекінського університету китайської медицини.